2015年与我国女科学家屠呦呦平分诺贝尔生理学或医学奖的是爱尔兰科学家威廉·坎贝尔和日本药物科学博士聪大村，他们二人的贡献是发现了一种新的药物，名为阿维菌素。聪大村从土壤样品中分离链霉菌的新菌株，这就

2015年与我国女科学家屠呦呦平分诺贝尔生理学或医学奖的是爱尔兰科学家威廉·坎贝尔和日本药物科学博士聪大村，他们二人的贡献是发现了一种新的药物，名为阿维菌素。聪大村从土壤样品中分离链霉菌的新菌株，这就是阿维菌素的来源。

（1）制备链霉菌培养基时，对培养基进行灭菌的常用方法是_________。倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是__________。

（2）在纯化过程中，在固体培养基上划线分离时，经培养，在划线的末端出现_________表明菌种已分离。在此过程中，正确的操作是________。

A.每次划线时，接种环都需要蘸菌液一次

B.划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种

C.在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风

D.划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连

（3）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，如培养纤维素分解菌的菌样应从_______的环境中采集。要鉴别纤维素分解菌，在该培养基中需要加入的特殊染料是________。

（4）某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是___________。

【答案】

高压蒸汽灭菌防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染不连续单个菌落(或单个菌落)C富含纤维素刚果红菌液浓度过高(土壤溶液稀释不够)

【解析】

由题意信息可知，该题考查的是微生物的实验室培养、分解纤维素的微生物的分离等相关基础知识。

(1)常常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。为了防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置。

(2) 平板划线法是指通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后，就可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。可见，在纯化过程中，在固体培养基上划线分离时，经培养，在划线的末端出现不连续单个菌落(或单个菌落)，表明菌种已分离。在固体培养基的平板上连续划线分离菌种时，只有首次划线时，需要用接种环蘸取菌液一次，A错误；划线分离时，需要把接种环部分深入到菌液中，而不是深入到培养基中，需要用接种环在培养基表明进行划线，但不要划破培养基，B错误；在超净平台中进行接种时，过滤风吹送的是过滤后的无菌空气，可防止杂菌污染，因此不能关闭过滤风，C正确；划线时不要将最后一区的划线与第一区的划线相连，D错误。

(3) 培养纤维素分解菌，应从富含纤维素的环境中采集菌样。刚果红可与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应。当纤维素被纤维素酶水解后，刚果红-纤维素复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。可见，若要鉴别纤维素分解菌，可向鉴别培养基中加入刚果红，然后挑选产生透明圈的菌落作为菌种进行扩大培养。

(4) 如果菌液浓度过高（或土壤溶液的稀释倍数较低），可导致培养基上的更多的菌落连在一起，形成一片。