为了研究海拉细胞的细胞增殖，以总细胞数和细胞分裂指数(细胞群体中分裂细胞所占的百分比)为测定指标，完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论(要求:细胞培养至培养液中营养物质不足。实验思路涉及的主要用

为了研究海拉细胞的细胞增殖，以总细胞数和细胞分裂指数(细胞群体中分裂细胞所占的百分比)为测定指标，完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论(要求:细胞培养至培养液中营养物质不足。实验思路涉及的主要用具须写出,但具体操作过程不做要求。实验条件适宜)回答下列问题

（1）完善实验思路：

①将己知细胞密度的海拉细胞悬液,用移液管加入到各个含细胞培养液的培养瓶中,然后置于CO2培养箱中培养

②__________对所得数据进行统计与处理

（2）预测实验结果（以坐标曲线图形表示实验结果）：______________________

（3）分析与讨论

①细胞计数时,见到压在方格线上的细胞如何计数？_______________

②若要得到大量的G1期细胞,可采用的方法__________，原因是__________。

③若为了检测某种药物对该细胞的增殖有促进作用，可在培养液中加入同位素标记的物质是________,原因是__________。

【答案】

每隔一段时间，用血细胞计数板在显微镜下计数并记录，同时制作临时装片，在显微镜下观察与计数分裂相细胞并记录

只计左线和上线上的细胞 减少培养液中的营养物质成分 由于原料缺少使细胞合成有关物质如RNA和蛋白质等受阻，而停滞于G1期 胸腺嘧啶脱氧核苷 胸腺嘧啶脱氧核苷是DNA合成的原料，其进入细胞的量可反映细胞的增殖情况

【解析】

（1）实验思路：将海拉细胞悬液置于培养箱中培养，每隔一段时间，用血细胞计数板在显微镜下计数并记录，同时制作临时装片，在显微镜下观察与计数分裂相关细胞并记录，对数据进行处理。

（2）预测实验结果：开始时由于有一定的营养物质，细胞进行分裂，总细胞数目不断增多，细胞分裂指数增长；一段时间后，由于营养物质的限制，细胞分裂减慢，分裂指数急剧减小；同时需注意计数时，死细胞也在统计细胞范围内，所以总细胞数和细胞分裂指数之间存在趋势差异，总细胞数变化相对较为平缓，故实验结果如图所示：

（3）分析与讨论：

①细胞计数时，压在方格边上的细胞，只计相邻两边及其夹角定点的数目，否则将产生误差。

②若要得到大量G1期细胞，可减少培养液中营养物质成分，是因为由于缺少原料而使得合成有关物质受阻，而停滞于此时期。

③胸腺嘧啶脱氧核苷酸是合成DNA的原料，可在培养液中用同位素标记，其进入细胞的量可反映细胞增殖情况。