下表是某同学列出的分离土壤中微生物的培养基配方,据此回答下列问题:
培养基配方 | |
KH2PO4 | 14g |
Na2HP04 | 2.1g |
MgS04•7H2O | 0.2g |
葡萄糖 | 10.0g |
尿素 | 10g |
琼脂 | 15.0g |
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000mL |
(1)从作用上看,该培养基属于__________养基,提供氮源的物质是__________,细菌能利用该氮源是由于体内能合成__________酶。
(2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时,还需在培养基中加入__________指示剂,若指示剂变__________, 说明有目的菌株存在。
(3)为了测定微生物的数量,接种时应采用__________法,某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106 的土壤样液0.1 mL,培养后菌落数分别为180、155、176、129个,则每毫升原土壤样液中上述微生物的数 量为__________个,测定的活菌数比实际活菌数__________(填“低”“高”或“基本一致”)。
【答案】选择尿素脲(催化尿素分解的)酚红红稀释涂布平板1.6×109低
【解析】培养微生物时,培养基中需要加入碳源、氮源、无机盐、水,还需要满足微生物生长对PH,特殊营养物质以及氧气的要求.如培养乳酸菌需要加入维生素,培养霉菌需要把PH值调到酸性等。能够分解利用尿素的细菌,其细胞内含有脲酶,可以把尿素分解成氨,提供N源,进一步利用,只含有尿素作为N源的培养基对微生物具有选择作用。
(1)题干指出甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基,其中尿素是作为唯一氮源,能生长的菌落说明能利用尿素中的氮源,所以甲从用途上属于选择培养基.其中含氮物质是尿素.能利用尿素为唯一氮源的分解菌,说明该微生物能在细胞内合成分解尿素的脲酶。
(2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时,还需在培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变红,说明有目的菌株存在。
(4)纯化微生物可以用稀释涂布法和平板划线法,其中稀释涂布法能用于微生物的计数。1毫升原土壤样液中上述微生物数量=(180+155+176+129)÷4×106÷0.1=1.6×109个;用稀释涂布平板法进行微生物的计数,但统计的数量比实际数量会偏少,原因是当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。
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